淋球菌感染檢查
包括涂片檢查,培養(yǎng)檢查,抗原檢測,基因診斷,藥敏試驗及產(chǎn)青霉素酶淋球菌(PPNG)測定。
1.涂片檢查
取患者尿道分泌物或宮頸分泌物,作革蘭染色,在多形核白細胞內找到革蘭陰性雙球菌。涂片法特異度較高,對急性患者靈敏度也較高,對慢性患者靈敏度較差。女性宮頸分泌物中雜菌多,敏感性和特異性較差,陽性率僅為50%~60%,且有假陽性,適合用培養(yǎng)法檢查。慢性淋病由于分泌物中淋球菌較少,陽性率低,因此要取前列腺按摩液,以提高檢出率。咽部涂片發(fā)現(xiàn)革蘭陰性雙球菌不能診斷淋病,因為其他奈瑟球菌屬在咽部是正常的菌群,需做糖發(fā)酵試驗進一步診斷。另外對癥狀不典型的涂片陽性應作進一步檢查。
2.培養(yǎng)檢查
淋球菌培養(yǎng)是診斷的重要佐證,培養(yǎng)法對癥狀很輕或無癥狀的男性、女性患者都是較敏感的方法,只要培養(yǎng)陽性就可確診,也是目前診斷無癥淋球菌感染的唯一可靠的方法。在基因診斷問世以前,培養(yǎng)是世界衛(wèi)生組織推薦的篩選淋病的惟一方法。目前國外推薦選擇培養(yǎng)基有改良的Thayer-Martin(TM)培養(yǎng)基和New York City(NYC)培養(yǎng)基。國內采用巧克力瓊脂或血瓊脂培養(yǎng)基,均含有抗生素,可選擇地抑制許多其他細菌生長。在36℃,70%濕度,含5%~10%二氧化碳(燭缸)環(huán)境中培養(yǎng),24~48h觀察結果。培養(yǎng)后還需進行菌落形態(tài),革蘭染色,氧化酶試驗和糖發(fā)酵試驗等鑒定。培養(yǎng)陽性率男性80%~95%,女性80%~90%。
3.抗原檢測
(1)固相酶免疫試驗(EIA):可用來檢測臨床標本中的淋球菌抗原。先用稀釋的標本液 包被載體, 然后加入抗淋球菌抗體, 再加入辣根過氧化酶偶聯(lián)的羊抗兔免疫璩蛋白,以上各步均經(jīng)溫育,水洗,最后加底物顯色,并用分光光度計記錄數(shù)據(jù),分析結果。
(2)直接免疫熒光試驗:通過熒光標記的單克隆抗體直接檢測淋球菌外膜蛋白-1。此法不僅敏感性較好, 且無交叉反應,是一種快速而準確的方法。在女性患者的標本檢驗中也獲得較好的效果。
(3)協(xié)同凝集試驗 用抗淋球菌蛋白I單克隆抗體致敏葡萄球菌A蛋白可與淋球菌發(fā)生協(xié)同凝集反應。此試驗簡易、快速、不需特豫設備, 敏惑性與特異性均較高。
4.基因診斷
(1)基因探針診斷:淋球菌的基因探針診斷,所用的探針有:質粒DNA探針、染色體基因探針和rRNA基因探針。基因探針診斷的敏感性較差。DNA探針法的敏感性與特異性均較高,是診斷淋病的一種快速可靠的方法,但此法由于條件所限,不便普及。
(2)基因擴增檢測:PCR技術的出現(xiàn)進一步提高了淋球菌檢測的靈敏性,它具有快速、靈敏、特異、簡便的優(yōu)點,可以直接檢測臨床標本中極微量的病原體,但因實驗條件要求高,技術難掌握。操作時要防止污染,以免出現(xiàn)假陽性。
5.藥敏試驗
在培養(yǎng)陽性后進一步作藥敏試驗。用紙片擴散法做敏感試驗,或用瓊脂平皿稀釋法測定最小抑菌濃度(MIC),用以指導選用抗生素。
6.PPNG檢測
β內酰胺酶,用紙片酸度定量法,使用Whatman I號濾紙PPNG菌株能使其顏色由藍變黃,陽性為P-PPNG,陰性為N-PPNG。