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淋巴細胞毒試驗-檢查項目-大眾養生網

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淋巴細胞毒試驗

基本信息

  • 專科分類： 腫瘤科
  • 檢查分類： 免疫檢查
  • 適用性別： 男女均適用
  • 是否空腹： 　空腹
  • 手術參考價： 25元
  • 科　室： 腫瘤科

淋巴細胞毒試驗檢查簡介

當特異的效應T淋巴細胞在體外與靶細胞接觸時，可表現出破壞和溶解靶細胞的特性，稱為淋巴細胞毒作用(cytotoxicity)。靶細胞可以是腫瘤細胞或其它組織細胞。淋巴細胞殺傷靶細胞的方式可通過直接殺傷或產生淋巴因子破壞靶細胞。本試驗方法有形態檢查法和同位素釋放法兩種。前者不需特殊設備，只需用顯微鏡計數靶細胞的存活數，操作比較方便。后者則是用125I-脫氧脲嘧啶核苷或51Cr標記靶細胞，以放射性同位素的釋放作為靶細胞受損傷的指標。此法需要特殊設備如液閃儀等，但可自動測量，結果重復性好。

淋巴細胞毒試驗檢查過程

淋巴細胞毒試驗的原理：各種貼壁生長的靶細胞，當被致敏的T淋巴細胞殺傷后可失去貼壁能力，故可從貼壁靶細胞數目的減少情況判斷淋巴細胞殺傷靶細胞的能力。

試劑：同形態檢查法和同位素釋放法。

操作方法：

（1）靶細胞的接種：選用能貼壁生長的腫瘤細胞，用Hank液洗滌后經2.5g/L胰酶消化2～3min，倒去胰酶液（細胞仍貼在瓶壁），用Hank液輕洗細胞3次，倒去Hank液。用含10%～20%小牛血清的RPMI1640液將貼壁細胞沖洗下來，用100目濾網過濾除去細胞團塊，制備成1×106/ml單個腫瘤細胞懸液，用滴管吸取細胞懸液滴入40孔培養板中，每孔1滴（約含100～150個細胞），置培養板于37℃含5%CO2孵箱中20h。取出培養板甩去其中培養液，瑞氏染色后計數每10孔中平均貼壁的腫瘤細胞數，如果兩組平均數相差＞1/3，表明誤差太大不能使用，如果誤差不大其它各培養板可進行正式試驗。

（2）分離淋巴細胞：取受檢者肝素抗凝血3ml，用聚蔗糖-泛影葡胺分層液分離淋巴細胞后再用Hank液洗3次，然后用RPMI1640液配成（2～3）×105/ml細胞懸液。

（3）細胞毒試驗：淋巴細胞和靶細胞按200∶1比例混合，每孔中加入（2～3）×104個淋巴細胞（0.1ml體積中）約每孔再加入含20%小牛血清的RPMI1640液0.1ml，置培養板于37℃5%CO2孵箱中40h。取出培養板甩去培養液，瑞氏染色后于顯微鏡下計數培養板底部殘留的靶細胞數。

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