三級(jí)甲等綜合醫(yī)院國(guó)營(yíng)
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(1)全血乳酸測(cè)定(分光光度法):
①應(yīng)在空腹及休息狀態(tài)下抽血。不用止血帶,不可用力握拳。如用止血帶,應(yīng)在穿刺后除去止血帶2min后再抽血。最好用肝素化的注射器抽血,抽取后立即注入預(yù)先稱量的含冰冷蛋白沉淀劑的試管中。如用血漿測(cè)定,每毫升血用10mg氟化鈉及2mg草酸鉀抗凝,立即冷卻標(biāo)本,并在15min內(nèi)離心。
抽血前試管編號(hào),稱重(Wt)并記錄。加入6mlMPA(50g/L),再稱重(Wm)后放入冰浴中,每份標(biāo)本最好作雙管分析。抽血后,立即注入上述試管中,每管2ml。顛倒混合3次,不可產(chǎn)生氣泡。待試管溫度與室溫平衡后,再稱重(Wb)。靜置至少15min后,離心沉淀(400r/min,15min)。上清液必須澄清。計(jì)算稀釋因數(shù)D:
D=Wb-Wt/Wb-Wm
②偏磷酸在水溶液易中形成多聚體(HPO3),水化成正磷酸(HPO3+H2O→H3PO4)。正磷酸不沉淀蛋白質(zhì),偏磷酸溶液沉淀蛋白的能力在4℃時(shí)僅能維持大約1周。
③本法線性范圍達(dá)5.6mmol/L(50mg/dl)。
④本法不用過氯酸作蛋白沉淀劑。
⑤一般乳酸鋰未標(biāo)明L-或DL-者,均為DL-型,L-型乳酸鋰價(jià)格昂貴。
(2)血漿乳酸測(cè)定(比色法):
①本法條件下,NBT還原生成物在反應(yīng)液中十分穩(wěn)定,無混濁和沉淀,吸光度久置不變。
②肝素抗凝血漿、血庫(kù)ACD保養(yǎng)液抗凝血漿、腦脊液、尿液、胃液等均可用本法測(cè)定。
③加入蛋白質(zhì)對(duì)反應(yīng)及生成物溶液的穩(wěn)定是必要的。同時(shí)加入蛋白質(zhì)及表面活性劑,可提高靈敏度及穩(wěn)定性。Brij-35和TritonX-100有同樣效果。人血清白蛋白中含乳酸濃度較高,不適用。因人血清白蛋白的顯色強(qiáng)度平均較牛血清白蛋白高1.06倍,如用牛血清白蛋白,且僅加于標(biāo)準(zhǔn)管中時(shí),標(biāo)準(zhǔn)管吸光度須乘此數(shù)。
④無乳酸蛋白液可與緩沖液預(yù)先混合后再加入1ml,代替表2中分別加入。
⑤本法線性范圍達(dá)8.0mmol/L(73mg/dl)。
⑥吸光度隨孵育時(shí)間延長(zhǎng)而增加,必須準(zhǔn)確10min。加入0.1mol/L鹽酸后吸光度不變。
⑦抗凝劑用肝素-氟化鈉較好(1mg肝素,6mg氟化鈉可抗凝5ml血)。血液抽出后,血標(biāo)本管置冰浴中送檢,盡快分離血漿,放冰室保存待測(cè)。草酸鉀對(duì)LDH有一定抑制作用,抽血較少而草酸鉀相對(duì)多時(shí)尤為明顯。
不合宜人群:一般無不適合的人群。
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