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血紅蛋白電泳

血紅蛋白電泳注意事項

微量血紅蛋白電電泳:
①浸膜:將醋酸纖維素膜漂浮于TEB緩沖液表面,待其均勻浸透沉下后,至少20min才可使用。這樣可防止產生氣泡。
②點樣:取出醋酸纖維薄膜用濾紙吸去多余的水份。用微量吸管吸取血紅蛋白溶液置于多標本加樣器的凹型槽內,以多標本加樣器蘸取血紅蛋白液,點樣于醋酸纖維素膜無光澤面。距陰極端1.5~2cm處,點樣量約3~5μl同時平行地點上正常血紅蛋白溶液作對照。
③電泳:在微型電泳槽兩側緩沖液槽內分別加入等量的BB緩沖液,以二層濾紙做鹽橋搭在醋酸纖維薄膜支架上。將膜無光澤面向下,點樣端接負極,平衡5min。接通電源。電壓180V,電流量約為0.2mA/cm膜寬,電泳時間20~30min。槽中緩沖液可在倒換電極后再用1次。
④染色:電泳后的薄膜放在麗春紅染色液中染色10min左右取出,用3%醋酸漂洗數次,至背景呈白色,陰干。
⑤透明:將醋酸纖維素膜置透明液中浸濕,貼于潔凈玻璃板上,用玻棒趕去二者之間的氣泡。于一層析缸內倒少量冰醋酸,將玻璃板反蓋在層析缸上(有薄膜面向內)。以揮發的冰醋酸熏10~20min,待膜透明即可取下。

血紅蛋白電泳不宜人群

無禁忌人群。

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