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胰島素原-檢查項目-大眾養生網

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胰島素原

基本信息

  • 專科分類： 生長發育檢查
  • 檢查分類： 血液檢查
  • 適用性別： 男女均適用
  • 是否空腹： 　空腹
  • 手術參考價： 40元
  • 科　室： 生長發育檢查

胰島素原檢查簡介

人胰島素原(proinsulin)是胰島素的前體物質，由胰島素和C肽組成，具有雙重免疫活性，既可與胰島素抗體結合，又可與C肽抗體結合。胰島素原由胰島β細胞合成和分泌，主要在腎臟分解代謝。生理情況下，只有極少量的胰島素原釋放入血，在病理情況下，胰島β細胞釋放胰島素原增多，血中胰島素原水平升高。

胰島素原檢查過程

（1）胰島素碘標記物制備和純化：

①取Na125I3.7×107Bq置于含胰島素2μg（20μl）的反應管內。

②加氯胺T溶液10μl。

③立即蓋緊，輕敲小管使試劑快速混和。

④12～15s后，加偏焦亞硫酸鈉溶液25μl（62.5μg）。

⑤把管內容物加至SephadexG-50柱上，用測定緩沖液洗滌，每管0.5ml收集45管，再用γ計數器計數。第一峰為125I標記的活性胰島素，第二峰是沒有結合的放射性碘。

（2）標記激素的免疫反應性估價：取第一峰收集物，以測定緩沖液稀釋至5000cpm/0.1ml，取0.1ml該標記物于小試管中，加入過量抗血清（0.1ml）及0.1ml測定緩沖液，在4℃溫育24h，然后加1ml葡聚糖活性炭懸浮液，在適當攪拌后，試管在4℃靜止15min，然后再離心15min，丟棄上清液，計數沉淀，沉淀計數應少于加入量的5%，如計數增加，指示125I-胰島素破壞。

（3）抗血清滴定：將抗血清系列稀釋，從1∶320000至1∶10000測定時，在小試管中加0.1ml測定緩沖液，0.1ml稀釋的抗血清，0.1ml稀釋的標記胰島素。在4℃溫育20h，然后加1ml葡聚糖活性炭，適當攪拌后，在4℃溫育15min后，再離心15min。丟棄上清液，測量沉淀物放射性計數，計數以加入量（F/T%）的35%～60%為合適的抗體稀釋度。

（4）胰島素測定：標準管與測定管做雙份，具體操作如下表（表1）：


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