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抗SS-A(Ro)抗體-檢查項目-大眾養生網

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抗SS-A(Ro)抗體

基本信息

  • 專科分類: 生長發育檢查
  • 檢查分類: 免疫檢查
  • 適用性別: 男女均適用
  • 是否空腹:  非空腹
  • 手術參考價: 20元
  • 科 室: 生長發育檢查

抗SS-A(Ro)抗體檢查簡介

抗SS-A(Ro)識別的表位位于細胞內與小核糖核酸hY1、hY3、hY4、hY5形成復合物的兩種蛋白質(60×103和52×103)上。這種核糖核酸蛋白顆粒的功能目前還未知,患者血清內的自身抗體可能針對其中一種,或者更常見的是同時針對兩種蛋白復合物。從分子生物學觀點看,兩種蛋白及它們基因高度保守,有特征性重復,兩者間并無密切聯系。因此,同時出現抗兩種蛋白的抗體并非由于交叉反應。

抗SS-A(Ro)抗體檢查過程

抗SS-A(Ro)抗體的測定原理:用間接免疫熒光法檢測時,抗SS-A/Ro、抗SS-B/La陽性結果表現為核的細斑點型免疫熒光,但抗SS-A/Ro引起的熒光亮度較弱。其操作與原理均與抗核抗體檢測相同。雙向免疫擴散法仍為抗SS-A/Ro、抗SS-B/La的常用檢測方法,但敏感性不高。目前常用免疫印跡法,其原理可參看抗Sm抗體測定。最近也有人用基因重組的52kD和60kD蛋白質建立ELISA法測定抗SSA/Ro抗體,用重組48kD蛋白質建立ELISA法測抗SS-A/La抗體,其敏感性較之免疫擴散法約高千倍,但因特異性問題(重組抗原中常含有細菌產物)未廣泛應用。一種敏感性和特異性都很高的方法是放射免疫沉淀法,此法是用放射性36S-蛋氨酸或32P-正磷酸鹽標記組織培養細胞,標記上36S的代表所有蛋白質,標記上32P的代表磷酸化蛋白,此外,細胞內RNAs也標記上32P。將待測血清與標記上放射性核素的組織細胞提取物混合,抗體與標記抗原反應,形成免疫復合物,用葡萄球菌A蛋白使免疫復合物沉淀,溶解后行SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳、放射自顯影,與自身抗體結合的放射性標記核抗原形成的條帶即可顯現出來,參照標準品形成的條帶進行分析,即可做出診斷。此法目前還只限于實驗室研究。

試劑:血清1ml。

操作方法:

(1)沉淀法:與抗Sm、抗RNP或抗SS-B等類似的檢測方法不同,小牛、兔、胸腺提取物由于沒有足夠濃度的Ro抗原,不能用于免疫雙擴散和反相免疫電泳,而主要從人脾組織或人培養細胞(WI-L2)獲得。沉淀帶與參考血清相同,核實為SS-A特異性。

(2)免疫印跡法:抗原采用細胞培養物如HeLa、MolT-4。當與參考血清有兩條相同典型帶(60×103和52×102)時,可確證為抗SSA(Ro)陽性。

(3)ELISA:可用親和純化或重組52×103和60×103蛋白,或相對純化的hY-RNP顆粒作抗原。

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